Gratias tibi ago quod Nature.com invisisti. Versio navigatri interretialis quam uteris limitatam sustentationem CSS habet. Optimos eventus causa, commendamus ut navigatro recentiore utaris (vel modum compatibilitatis in Internet Explorer debilites). Interea, ut sustentationem continuam praestemus, situm sine stylis et JavaScript demonstrabimus.
Constitutio exemplorum animalium mutationis modicae (MC) fundamentum magnum est ad MC studendum. Quinquaginta quattuor cuniculi albi Novae Zelandiae in gregem operationis simulatae, gregem implantationis musculi (gregem ME) et gregem implantationis nuclei pulposi (gregem NPE) divisi sunt. In grege NPE, discus intervertebralis per chirurgicam lumbarem anterolateralem detectus est et acus ad corpus vertebrale L5 prope laminam terminalem pungendum adhibita est. NP e disco intervertebrali L1/2 syringe extractum et in eum iniectum est. Foramen in osse subchondrali perforatum. Procedurae chirurgicae et methodi perforationis in grege implantationis musculi et grege operationis simulatae eaedem erant ac in grege implantationis NP. In grege ME, frustum musculi in foramen positum est, dum in grege operationis simulatae, nihil in foramen positum est. Post operationem, MRI et probationes biologicae molecularis peractae sunt. Signum in grege NPE mutatum est, sed nulla mutatio signi manifesta in grege operationis simulatae et grege ME apparuit. Observatio histologica demonstravit proliferationem textus abnormalem in loco implantationis observatam esse, et expressionem IL-4, IL-17 et IFN-γ auctam esse in grege NPE. Implantatio NP in os subchondrale exemplar animale MC formare potest.
Mutationes modicae (MC) sunt laesiones laminarum terminalium vertebralium et medullae ossium adiacentium, quae in resonantia magnetica (MRI) visibilia sunt. Satis communes sunt in individuis cum symptomatibus conexis1. Multae investigationes momentum MC propter associationem cum dolore lumborum (DDL)2,3 extulerunt. de Roos et al.4 et Modic et al.5 independenter primum tres diversos typos abnormalitatum signorum subchondralium in medulla ossium vertebralium descripserunt. Mutationes modicae typi I hypointensae in seriebus T1-ponderatis (T1W) et hyperintensae in seriebus T2-ponderatis (T2W) sunt. Haec laesio laminas terminales fissurarum et textum granulationis vascularis adiacentem in medulla ossium revelat. Mutationes modicae typi II signum altum in seriebus T1W et T2W ostendunt. In hoc genere laesionis, destructio laminarum terminalium inveniri potest, necnon substitutio histologica adiposa medullae ossium adiacentium. Mutationes modicae typi III signum humile in seriebus T1W et T2W ostendunt. Laesiones scleroticae laminis terminalibus correspondentes observatae sunt6. MC morbus pathologicus spinae habetur et cum multis morbis degenerativis spinae arcte coniungitur7,8,9.
Consideratis datis praesto, plura studia perspicientiam accuratam in aetiologiam et mechanismos pathologicos MC praebuerunt. Albert et al. suggesserunt MC fortasse herniatione disci causari. Hu et al. MC degenerationi disci gravi attribuerunt. Kroc notionem "rupturae disci interni" proposuit, quae affirmat trauma disci repetitivum ad microlacerationes in lamina terminali ducere posse. Post formationem fissurae, destructio laminae terminalis a nucleo pulposo (NP) responsum autoimmune incitare potest, quod ulterius ad evolutionem MC11 ducit. Ma et al. similem opinionem habuerunt et rettulerunt autoimmunitatem ab NP inductam partes claves in pathogenesi MC12 agere.
Cellulae systematis immunitatis, praesertim lymphocyti T adiutores CD4+, partes criticas in pathogenesi autoimmunitatis agunt13. Subgrex Th17 nuper inventum cytokinum proinflammatorium IL-17 producit, expressionem chemokinorum promovet, et cellulas T in organis laesis ad IFN-γ14 producendum stimulat. Cellulae Th2 etiam partes singulares in pathogenesi responsionum immunitatum agunt. Expressio IL-4 ut cellula Th2 repraesentativa ad graves consequentias immunopathologicas ducere potest15.
Quamquam multa studia clinica de MC16,17,18,19,20,21,22,23,24 peracta sunt, adhuc desunt exempla experimentalia animalia idonea quae processum MC, qui saepe in hominibus occurrit, imitari possint et ad investigandam aetiologiam vel novas curationes, ut therapiam directam, adhiberi queant. Adhuc, pauca tantum exempla animalia MC relata sunt ad subiacentes mechanismos pathologicos investigandos.
Hoc studium, innixum theoriae autoimmunis ab Alberto et Ma propositae, exemplar MC leporinum simplex et reproducibile constituit per autotransplantationem nanoparticulae (NP) prope laminam terminalem vertebralem perforatam. Alia proposita sunt observare proprietates histologicas exemplorum animalium et aestimare mechanismos specificos NP in evolutione MC. Ad hunc finem, utimur technicis sicut biologia molecularis, resonantia magnetica (MRI), et studiis histologicis ad progressionem MC investigandam.
Duo cuniculi ex sanguinatione inter chirurgiam mortui sunt, et quattuor cuniculi inter anaesthesiam inter resonantiam magneticam (MRI) mortui sunt. Reliqui quadraginta octo cuniculi supervixerunt nec ulla signa neurologica nec morum post chirurgiam ostenderunt.
Imago resonantiae magneticae (MRI) ostendit intensionem signi textus inclusi in diversis foraminibus differre. Intensitas signi corporis vertebralis L5 in grege NPE gradatim mutata est post hebdomades 12, 16 et 20 post insertionem (sequentia T1W signum humile ostendit, et sequentia T2W signum mixtum plus signum humile ostendit) (Fig. 1C), dum aspectus MRI duorum aliorum gregum partium inclusarum relative stabilis mansit per idem tempus (Fig. 1A, B).
(A) Imagines resonantiae magneticae (MRI) columnae lumbalis leporis sequentiales tribus temporibus repraesentativae. Nullae abnormalitates signorum in imaginibus gregis operationis simulatae inventae sunt. (B) Proprietates signorum corporis vertebralis in grege ME similes sunt illis in grege operationis simulatae, et nulla mutatio significans signorum in loco inclusionis per tempus observatur. (C) In grege NPE, signum humile clare conspicitur in sequentia T1W, et signum mixtum et signum humile clare conspicuntur in sequentia T2W. A periodo 12 hebdomadum ad periodum 20 hebdomadum, signa alta sporadica signa humilia in sequentia T2W circumdantia decrescunt.
Hyperplasia ossium manifesta in loco implantationis corporis vertebralis in grege NPE videri potest, et hyperplasia ossium velocius ab hebdomadibus 12 ad 20 occurrit (Fig. 2C) comparata cum grege NPE, nulla mutatio significativa in corporibus vertebralibus simulatis observatur; grex Sham et grex ME (Fig. 2C) 2A,B).
(A) Superficies corporis vertebralis ad partem implantatam valde levis est, foramen bene sanatur, et nulla hyperplasia in corpore vertebrali est. (B) Forma loci implantati in grege ME similis est illi in grege operationis simulatae, et nulla mutatio manifesta in aspectu loci implantati per tempus est. (C) Hyperplasia ossis ad locum implantatum in grege NPE apparuit. Hyperplasia ossis celeriter aucta est et etiam per discum intervertebralem ad corpus vertebrale contralaterale extensa est.
Analysis histologica informationem uberiorem de formatione ossium praebet. Figura 3 imagines sectionum postoperativarum H&E tinctarum ostendit. In grege operationis simulatae, chondrocyti bene dispositi erant et nulla proliferatio cellularum detecta est (Fig. 3A). Situatio in grege ME similis erat ei in grege operationis simulatae (Fig. 3B). Attamen, in grege NPE, magnus numerus chondrocytorum et proliferatio cellularum NP-similum in loco implantationis observata est (Fig. 3C);
(A) Trabeculae prope laminam terminalem videri possunt, chondrocyti ordinate dispositi sunt, magnitudine et forma cellularum uniformi, nulla proliferatione (40 vicibus). (B) Conditio loci implantationis in grege ME similis est gregi simulato. Trabeculae et chondrocyti videri possunt, sed nulla proliferatio manifesta in loco implantationis est (40 vicibus). (B) Videtur chondrocytos et cellulas NP similes significanter proliferare, et formam magnitudinemque chondrocytorum inaequales esse (40 vicibus).
Expressio mRNA interleukini 4 (IL-4), mRNA interleukini 17 (IL-17), et mRNA interferoni γ (IFN-γ) in utroque grege NPE et ME observata est. Cum gradus expressionis genorum destinatorum comparati sunt, expressiones genorum IL-4, IL-17, et IFN-γ significanter auctae sunt in grege NPE comparatae cum illis gregis ME et gregis operationis simulatae (Fig. 4) (P < 0.05). Comparatae cum grege operationis simulatae, gradus expressionis IL-4, IL-17, et IFN-γ in grege ME tantum leviter aucti sunt nec mutationem statisticam attigerunt (P > 0.05).
Expressio mRNA IL-4, IL-17 et IFN-γ in grege NPE inclinationem significanter altiorem ostendit quam in grege operationis simulatae et grege ME (P < 0.05).
Contra, gradus expressionis in grege ME nullam differentiam significantem ostenderunt (P > 0.05).
Analysis per "Western blot" peracta est utens anticorporibus commercialiter praesto contra IL-4 et IL-17 ad confirmandum exemplar expressionis mRNA mutatum. Ut in Figuris 5A et B demonstratur, comparatis cum grege ME et grege operationis fictae, gradus proteinorum IL-4 et IL-17 in grege NPE significanter aucti sunt (P < 0.05). Comparatis cum grege operationis fictae, gradus proteinorum IL-4 et IL-17 in grege ME etiam mutationes statistice significantes non attingere potuerunt (P > 0.05).
(A) Gradus proteinorum IL-4 et IL-17 in grege NPE significanter altiores erant quam in grege ME et grege placebo (P < 0.05). (B) Histogramma maculae occidentalis.
Propter numerum limitatum exemplorum humanorum per chirurgiam collectorum, studia clara et accurata de pathogenesi MC difficilia sunt. Conati sumus exemplar animale MC constituere ad potentiales eius mechanismos pathologicos investigandos. Simul, aestimatio radiologica, aestimatio histologica et aestimatio biologica molecularis adhibitae sunt ad cursum MC ab autotranspiratione nanoparticulae (NP) inductae sequendum. Propterea, exemplar implantationis NP mutationem gradatim in intensitate signi ab punctis temporalibus 12 hebdomadum ad 20 hebdomadum effecit (signum mixtum humile in seriebus T1W et signum humile in seriebus T2W), mutationes textuum indicans, et aestimationes histologicae et biologicae molecularis eventus studii radiologici confirmaverunt.
Experimenti huius eventus ostendunt mutationes visuales et histologicas in loco laesionis corporis vertebralis in grege NPE evenisse. Simul, expressio genorum IL-4, IL-17 et IFN-γ, necnon IL-4, IL-17 et IFN-γ observata est, quod indicat laesionem textus nuclei pulposi autologi in corpore vertebrali seriem mutationum signorum et morphologicarum causare posse. Facile est invenire proprietates signorum corporum vertebralium exemplaris animalis (signum humile in sequentia T1W, signum mixtum et signum humile in sequentia T2W) valde similes esse illis cellularum vertebralium humanarum, et proprietates MRI etiam observationes histologiae et anatomiae crassae confirmant, id est, mutationes in cellulis corporis vertebralis progressivas esse. Quamquam responsio inflammatoria a trauma acuto causata paulo post puncturam apparere potest, eventus MRI demonstraverunt mutationes signorum progressive crescentes 12 septimanas post puncturam apparuisse et usque ad 20 septimanas perstitisse sine ullis signis recuperationis vel reversionis mutationum MRI. Haec eventa suggerunt nanoparticulam vertebralem autologam esse methodum fidam ad progressivam VM in cuniculis constituendam.
Hoc exemplar puncturae satis peritiam, tempus, et laborem chirurgicum requirit. In experimentis praeliminaribus, dissectio vel nimia stimulatio structurarum ligamentorum paravertebralium formationem osteophytorum vertebralium efficere potest. Cavendum est ne discos adiacentes laedantur vel irritentur. Cum profunditas penetrationis moderanda sit ut eventus constantes et reproducibiles obtineantur, obturaculum manu fecimus, vaginam acus 3 mm longae abscindendo. Hoc obturaculo utens uniformitatem perforationis in corpore vertebrali efficit. In experimentis praeliminaribus, tres chirurgi orthopedici in operatione implicati invenerunt acus 16-calibri faciliores ad tractandum quam acus 18-calibri vel alias methodos. Ad sanguinationem excessivam durante perforatione vitandam, acum per aliquod tempus immobile tenendo foramen insertionis aptius praebebit, quod suggerit certum gradum MC hoc modo moderari posse.
Quamquam multae investigationes MC spectaverunt, parum de aetiologia et pathogenesi MC25,26,27 constat. Ex studiis nostris prioribus, invenimus autoimmunitatem partes magnas agere in eventu et evolutione MC12. Hoc studium expressionem quantitativam IL-4, IL-17, et IFN-γ examinavit, quae sunt principales viae differentiationis cellularum CD4+ post stimulationem antigeni. In nostro studio, comparato cum grege negativo, grex NPE maiorem expressionem IL-4, IL-17, et IFN-γ habuit, et gradus proteinorum IL-4 et IL-17 etiam altiores erant.
Clinice, expressio mRNA IL-17 augetur in cellulis NP aegrotorum cum herniatione disci28. Auctae expressionis IL-4 et IFN-γ etiam inventae sunt in exemplo herniationis disci acutae non compressivae comparatae cum subiectis sanis29. IL-17 partes clavem agit in inflammatione, laesione textus in morbis autoimmunibus30 et auget responsum immune ad IFN-γ31. Aucta laesio textus IL-17-mediata relata est in muribus MRL/lpr32 et muribus autoimmunitati susceptibilibus33. IL-4 expressionem cytokinorum proinflammatoriorum (ut IL-1β et TNFα) et activationem macrophagorum34 inhibere potest. Relatum est expressionem mRNA IL-4 differre in grege NPE comparata cum IL-17 et IFN-γ eodem tempore; expressio mRNA IFN-γ in grege NPE significanter altior erat quam in aliis gregibus. Ergo, productio IFN-γ mediator responsi inflammatorii inducti ab intercalatione NP esse potest. Studia demonstraverunt IFN-γ a multis generibus cellularum produci, inter quas celluli T adiutores typi 1 activati, cellulae naturales necatrices, et macrophagi35,36, et esse cytokinum pro-inflammatorium clavem quod responsa immunologica promovet37.
Hoc studium suggerit responsum autoimmune fortasse implicatum esse in eventu et evolutione MC. Luoma et al. invenerunt notas signorum MC et nanoparticulae prominentis similes esse in MRI, et utrumque signum altum in sequentia T2W ostendere38. Quaedam cytokina confirmata sunt arcte coniuncta cum eventu MC, ut IL-139. Ma et al. suggesserunt protrusionem sursum vel deorsum NP magnam vim habere posse in eventu et evolutione MC12. Bobechko40 et Herzbein et al.41 rettulerunt NP esse textum immunotolerantem qui circulationem vascularem a nativitate intrare non potest. Protrusiones NP corpora aliena in copiam sanguinis introducunt, ita reactiones autoimmunes locales mediantes42. Reactiones autoimmunes magnum numerum factorum immunium inducere possunt, et cum hi factores continue textibus exponuntur, mutationes in signalatione causare possunt43. In hoc studio, overexpressio IL-4, IL-17 et IFN-γ sunt factores immunis typici, ulterius probans artam relationem inter NP et MCs44. Hoc exemplar animale bene eruptionem nanoparticulae (NP) et ingressum in laminam terminalem imitatur. Hic processus porro effectum autoimmunitatis in laminam terminalem (MC) revelavit.
Ut expectatum est, hoc exemplar animale nobis praebet suggestum possibile ad MC studendum. Attamen, hoc exemplar adhuc nonnullas limitationes habet: primo, per tempus observationis animalium, nonnulli cuniculi intermedii ad probationes histologicas et biologiae molecularis euthanasia necandi sunt, ita quaedam animalia tempore "inutilia fiunt". Secundo, quamquam tria tempora in hoc studio constituta sunt, infeliciter, unum tantum typum MC (mutationem Modic typi I) simulavimus, ita non sufficit ad processum evolutionis morbi humani repraesentandum, et plura tempora constituenda sunt ad omnes mutationes signorum melius observandas. Tertio, mutationes in structura textus quidem clare per tinctionem histologicam ostendi possunt, sed quaedam technicae speciales mutationes microstructurales in hoc exemplo melius revelare possunt. Exempli gratia, microscopia lucis polarizatae adhibita est ad formationem fibrocartilaginis in discis intervertebralibus cuniculorum analysandam. Effectus diuturni NP in MC et lamina terminali ulteriore studio indigent.
Quinquaginta quattuor cuniculi albi Novae Zelandiae mares (pondus circiter 2.5-3 kg, aetatis 3-3.5 mensium) temere divisi sunt in gregem operationis simulatae, gregem implantationis musculi (grex ME) et gregem implantationis radicis nervorum (grex NPE). Omnes rationes experimentales a Commissione Ethica Nosocomii Tianjin probatae sunt, et methodi experimentales stricte secundum normas probatas peractae sunt.
Quaedam emendationes in arte chirurgica S. Sobajima 46 factae sunt. Quisque cuniculus in positione laterali decumbente positus est, et superficies anterior quinque discorum intervertebralium lumbalium (IVD) consecutivorum per aditum posterolateralem retroperitonealem exposita est. Quisque cuniculus anaesthesia generali data est (20% urethani, 5 ml/kg per venam auricularem). Incisio cutis longitudinalis facta est ab margine inferiore costarum ad marginem pelvis, 2 cm ventraliter ad musculos paravertebrales. Spina anterolateralis dextra ab L1 ad L6 dissectione acuta et obtusa textus subcutanei suprajacentis, textus retroperitonealis, et musculorum exposita est (Fig. 6A). Planities disci determinata est adhibito margine pelvis ut signo anatomico pro planities disci L5-L6. Acus punctoria 16-gauge ad foramen prope laminam terminalem vertebrae L5 ad profunditatem 3 mm perforandum adhibita est (Fig. 6B). Syringa 5 ml ad nucleum pulposum autologum in disco intervertebrali L1-L2 aspirandum adhibeatur (Fig. 6C). Nucleum pulposum vel musculum secundum necessitates cuiusque coetus removeatur. Postquam foramen profundius effossum est, suturae absorbibiles in fascia profunda, fascia superficiali et cute ponuntur, cavendo ne textus periosteus corporis vertebralis per chirurgiam laedatur.
(A) Discus L5–L6 per aditum posterolateralem retroperitonealem exponitur. (B) Acus 16-gauge ad foramen prope laminam terminalem L5 terebrandum adhibeatur. (C) Microfibræ autologæ colliguntur.
Anesthesia generalis administrata est cum urethano 20% (5 ml/kg) per venam auris administrato, et radiographia columnae lumbalis post operationem hebdomades 12, 16, et 20 repetita est.
Cuniculi per injectionem intramuscularem ketaminae (25.0 mg/kg) et natrii pentobarbitalis intravenosam (1.2 g/kg) hebdomadibus 12, 16, et 20 post chirurgiam immolati sunt. Tota spina ad analysin histologicam sublata est et vera analysis peracta est. Transcriptio reversa quantitativa (RT-qPCR) et Western blotting adhibitae sunt ad mutationes in factoribus immunitatis detegendas.
Examinationes resonantiae magneticae (MRI) in cuniculis peractae sunt utens magnete clinico 3.0 T (GE Medical Systems, Florence, SC) instructo receptore spirali orthogonali membri. Cuniculi per venam auris anesthetizati sunt urethano 20% (5 mL/kg), deinde supini intra magnetem positi, regione lumbari centrata in spira superficiali circulari 5 unciarum diametro (GE Medical Systems). Imagines localizatoris coronalis T2-ponderatae (TR, 1445 ms; TE, 37 ms) acquisitae sunt ad locum disci lumbalis ab L3-L4 ad L5-L6 definiendum. Sectiones plani sagittalis T2-ponderatae cum sequentibus optionibus acquisitae sunt: sequentia spin-echo rapida cum tempore repetitionis (TR) 2200 ms et tempore echo (TE) 70 ms, matrice; campo visuali 260 et octo stimulis; crassitudo sectionis 2 mm erat, hiatus 0.2 mm.
Postquam ultima photographia capta est et ultimus cuniculus occisus est, disci simulati, musculis inclusi, et NP ad examinationem histologicam remoti sunt. Textus in formalino 10% neutro tamponato per hebdomadam unam fixati, acido ethylenediaminetetraacetico decalcificati, et paraffino secti sunt. Frusta textus in paraffino inclusa et in sectiones sagittales (5 μm crassas) microtomo secta sunt. Sectiones haematoxylino et eosino (H&E) tinctae sunt.
Postquam discos intervertebrales ex cuniculis in quoque grege collegerunt, RNA totalis extracta est utens columna UNIQ-10 (Shanghai Sangon Biotechnology Co., Ltd., Sina) secundum instructiones fabricatoris et systemate transcriptionis reversae ImProm II (Promega Inc., Madison, WI, USA). Transcriptio reversa peracta est.
RT-qPCR peracta est utens Prism 7300 (Applied Biosystems Inc., USA) et SYBR Green Jump Start Taq ReadyMix (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) secundum instructiones fabricatoris. Volumen reactionis PCR erat 20 μl et continebat 1.5 μl cDNA diluti et 0.2 μM cuiusque primeri. Primeri designati sunt ab OligoPerfect Designer (Invitrogen, Valencia, CA) et fabricati a Nanjing Golden Stewart Biotechnology Co., Ltd. (Sina) (Tabula 1). Hae condiciones cycli thermalis adhibitae sunt: gradus initialis activationis polymerasis ad 94°C per 2 min, deinde 40 cycli 15 s quisque ad 94°C pro denaturatione formae, recoctio per 1 min ad 60°C, extensio, et fluorescentia. Mensurae peractae sunt per 1 min ad 72°C. Omnia exempla ter amplificata sunt et valor medius ad analysin RT-qPCR adhibitus est. Amplificationis data per FlexStation 3 (Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA) analysata sunt. Expressio genorum IL-4, IL-17, et IFN-γ ad normam moderatoris endogeni (ACTB) normalizata est. Gradus expressionis relativi mRNA destinati per methodum 2-ΔΔCT calculati sunt.
Totum proteinum e textibus extractum est per homogenizatorem textuum in RIPA lysis buffer (continente mixturam inhibitorum proteasis et phosphatasis) et deinde centrifugatum est ad 13,000 rpm per 20 min ad 4°C ad removendas reliquias textuum. Quinquaginta microgrammata proteini per lineam imponuntur, separata sunt per 10% SDS-PAGE, et deinde translata sunt ad membranam PVDF. Obstructio peracta est in lacte sicco exadiposo 5% in solutione salina Tris-buffered (TBS) continente 0.1% Tween 20 per 1 h ad temperaturam ambientem. Membrana incubata est cum anticorpore primario leporino anti-decorin (dilutio 1:200; Boster, Wuhan, Sina) (dilutio 1:200; Bioss, Beijing, Sina) per noctem ad 4°C et in diebus secundis reagebat; cum anticorpore secundario (immunoglobulinum caprinum anti-leporinum G dilutione 1:40,000) cum peroxidasa armoraciae rusticanae (Boster, Wuhan, Sina) per horam unam ad temperaturam ambientem combinato. Signa "Western blot" detecta sunt per chemiluminescentiam auctam in membrana chemiluminescente post irradiationem radiorum X. Ad analysin densitometricam, maculae perscrutatae et quantificatae sunt programmate BandScan utens, et eventus expressa sunt ut proportio immunoreactivitatis geni scopi ad immunoreactivitatem tubulini.
Computationes statisticae peractae sunt programmate SPSS 16.0 (SPSS, USA). Data per studium collecta expressa sunt ut media ± deviatio standard (media ± SD) et analysata sunt per analysin variantiae mensurarum repetitarum unidirectionalem (ANOVA) ad differentias inter duos greges determinandas. Valor P < 0.05 statistice significans habitum est.
Ergo, constitutio exemplaris animalis MC per implantationem nanoparticulorum autologorum in corpus vertebrale et observationem macroanatomicam, analysin MRI, aestimationem histologicam et analysin biologicam molecularem peracta instrumentum magni momenti ad mechanismos MC humanae aestimandos et intellegendos et novas interventiones therapeuticas evolvendas fieri potest.
Quomodo hunc articulum citare: Han, C. et al. Exemplar animale mutationum Modicarum constitutum est implantando nucleum pulposum autologum in os subchondrale columnae lumbalis. Sci. Rep. 6, 35102: 10.1038/srep35102 (2016).
Weishaupt, D., Zanetti, M., Hodler, J., et Boos, N. Imago resonantiae magneticae columnae lumbalis: praevalentia herniationis et retentionis disci, compressionis radicis nervorum, anomaliarum laminae terminalis, et osteoarthritis articulationis facetariae in voluntariis asymptomaticis. *Rate*. Radiology 209, 661–666, doi:10.1148/radiology.209.3.9844656 (1998).
Kjaer, P., Korsholm, L., Bendix, T., Sorensen, JS, et Leboeuf-Eed, K. Mutationes modicae et earum relatio ad inventiones clinicas. *European Spine Journal*: publicatio officialis Societatis Europaeae Spinae, Societatis Europaeae Deformitatis Spinalis, et Societatis Europaeae pro Investigatione Spinae Cervicalis 15, 1312–1319, doi: 10.1007/s00586-006-0185-x (2006).
Kuisma, M., et al. Mutationes modicae in laminis terminalibus vertebrarum lumbalium: praevalentia et consociatio cum dolore lumborum inferiorum et ischiade in operariis masculinis mediae aetatis. Spina 32, 1116–1122, doi:10.1097/01.brs.0000261561.12944.ff (2007).
de Roos, A., Kressel, H., Spritzer, K., et Dalinka, M. Imago resonantiae magneticae (MRI) mutationum medullae ossium prope laminam terminalem in morbo degenerativo columnae lumbalis. AJR. *American Journal of Radiology* 149, 531–534, doi: 10.2214/ajr.149.3.531 (1987).
Modic, MT, Steinberg, PM, Ross, JS, Masaryk, TJ, et Carter, JR. Morbus disci degenerativus: aestimatio mutationum medullae vertebralis per MRI. Radiology 166, 193–199, doi:10.1148/radiology.166.1.3336678 (1988).
Modic, MT, Masaryk, TJ, Ross, JS, et Carter, JR. Imago morbi disci degenerativi. Radiology 168, 177–186, doi: 10.1148/radiology.168.1.3289089 (1988).
Jensen, TS, et al. Praedictores laminae terminalis neovertebralis (Modic) mutationes in populatione generali significant. *European Spine Journal: Publicatio Officialis Societatis Europaeae Spinae, Societatis Europaeae Deformitatis Spinalis, et Societatis Europaeae pro Investigatione Spinae Cervicalis, Divisio 19, 129–135, doi: 10.1007/s00586-009-1184-5 (2010).
Albertus, HB et Mannisch, K. Mutationes modicae post herniationem disci lumbalis. *European Spine Journal: Publicatio Officialis Societatis Europaeae Spinae, Societatis Europaeae Deformitatis Spinalis et Societatis Europaeae pro Investigatione Spinae Cervicalis* 16, 977–982, doi: 10.1007/s00586-007-0336-8 (2007).
Kerttula, L., Luoma, K., Vehmas, T., Gronblad, M., et Kaapa, E. Mutationes modicae typi I degenerationem disci deformationalem celeriter progressivam praedicere possunt: studium prospectivum unius anni. *European Spine Journal* 21, 1135–1142, doi: 10.1007/s00586-012-2147-9 (2012).
Hu, ZJ, Zhao, FD, Fang, XQ et Fan, SW. Mutationes modicae: causae possibiles et contributio ad degenerationem disci lumbalis. Hypotheses Medicae 73, 930–932, doi: 10.1016/j.mehy.2009.06.038 (2009).
Krok, HV Ruptura disci interni. Problemata prolapsus disci per annos quinquaginta. Spine (Phila Pa 1976) 11, 650–653 (1986).
Tempus publicationis: XIII Decembris MMXXIV